问答题
T4 DNA连接酶的最佳反应温度为37℃,但在使用T4 DNA连接酶催化DNA黏性末端的连接反应时,通常将反应温度设定在16℃或者更低,请解释原因。
【正确答案】
线性DNA的末端存在末端绽裂现象,即DNA末端的双链结构存在一定程度的解链,温度越高,解链现象越严重。这也就阻碍了两个DNA片段的黏性末端互补碱基间的配对,不利于连接反应的进行。因此较低的温度也有利于黏性末端间双链结构的稳定,提高连接反应的效率。
【答案解析】
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