简述用放射性同位素
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H-TdR(氚胸腺嘧啶)标记法来测定细胞周期长短的原理。假如一种体外培养的非同步生长细胞,它的细胞周期G
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期是6小时,S期是6小时,G
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期是5小时,M期是1小时,如果用
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H-TdR标记细胞15分钟后,立即洗去
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H-TdR,然后放置在新鲜培养基中继续培养。请问:
(1)用
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H-TdR标记15分钟后,这时被标记的细胞占细胞总数的百分比是多少?
(2)用
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H-TdR标记15分钟后,洗净后放置在新鲜培养基中培养18小时,这时被标记的M期细胞又占多少比例?
【正确答案】
用3H-TdR标记法测定细胞周期长短的原理:用放射性同位素3H-TdR(氚胸腺嘧啶)标记细胞,3H-TdR(氚胸腺嘧啶)在DNA复制过程中被整合入新合成的DNA从而对细胞做上标记。短暂标记后将细胞转移到新鲜普通培养基中培养,每隔一定时间取样做放射自显影观察分析,从而确定细胞周期各时相的长短。 (1)用3H-TdR标记15分钟后,此时被标记的细胞是S期的细胞,占6/(6+6+5+1)=1/3。 (2)这类细胞的细胞周期刚好是18小时,因此培养18小时后所有的细胞均被标记。被标记的M期细胞占1/18。
【答案解析】
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