说说cDNA差示分析法的原理和主要实验流程。
 
【正确答案】基本原理:该法充分发挥了PCR技术以指数形式扩增双链DNA模板的特性,通过降低cDNA群体复杂性和更换cDNA两端接头等方法,特异性扩增目的基因片段。试验对象和供试探针经4碱基切割酶处理,形成平均长度256bp的代表群然后通过PCR和杂交等步骤获得差异表达的基因。 主要实验流程:将含目的基因的试验对象(Tester,T)与不含目的基因的供试探针(Driver,D)分别用4碱基切割酶处理,得到平均长度为256bp的代表群,加12/24碱基接头,补平末端,以24碱基的互补序列为引物进行PCR,T改换新接头,D不加接头,将T与D按1:100杂交,设计新接头引物,通过PCR,指数扩增产物差异产物。
【答案解析】