问答题 当含有下列性质蛋白质混合物A:相对分子质量12000,pI=10,B:相对分子质量62000,pI=4;C:相对分子质量2800,pI=7;D:相对分子质量9000,pI=5。若不考虑其他因素,问:

问答题 当它们流经DEAE纤维素阴离子交换树脂时,这些蛋白质被洗脱顺序如何?为什么?
【正确答案】(1)A、B、C、D四种蛋白质,与离子交换剂结合力越弱,在洗脱时越先洗脱下来,由其等电点可知,与DEAE纤维素阴离子交换树脂结合力由强到弱的顺序为B、D、C、A,因此其洗脱顺序为:A、C、D、B。
【答案解析】
问答题 当它们流经Sephadex G-50凝胶层析柱时,这些蛋白质被洗脱顺序如何?为什么?
【正确答案】当A、B、C、D四种蛋白质流经Sephadex G-50凝胶层析柱时,这些蛋白质被洗脱,其洗脱顺序为:B、C、A、D。其原因是,凝胶过滤是根据分子大小不同的分离方法,当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶层析柱时,比凝胶网孔大的分子不能进入珠内网状结构,而被排阻在凝胶珠之外,随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动并最先流出柱外;比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外,相对分子质量越大流经途径越短,越最先分离出来。
【答案解析】