【正确答案】亲和层析是指利用蛋白质分子与其配体分子特有的识别能力(即生物学亲和力),建立起来的一种有效的纯化方法。 (1)亲和层析的基本原理分为以下几个层次: ①将待纯化的某一蛋白质的特异性配体,通过适当的化学反应共价地连接到像琼脂糖凝胶一类的载体表面的功能基(如-OH)上。一般在载体和配体之间插入一段长度适当的连接臂,防止载体表面的位阻妨碍待分离的分子与配体结合; ②当蛋白质混合物加到填有亲和介质的层析柱时,待纯化的某一蛋白被吸附在含配体的琼脂糖颗粒表面,而其他的蛋白质则因对该配体无特异的结合部位而不被吸附; ③不被特异性吸附的蛋白质通过洗涤即可除去,被特异性结合的蛋白质可用含有相应的游离配体的溶液将其从柱上洗脱下来。 (2)亲和层析的应用 由于亲和层析操作简单,分离纯度高,现已广泛地用于核苷酸、核酸、免疫球蛋白、细胞器甚至完整细胞的纯化。在此基础上,可以寻找、发掘适合各种有药物作用的生物活性物质的配体,从复杂的基质中分离纯化诸如褪黑素、干扰素等药物,并保证所获得的物质具有较高的生物活性。
【答案解析】