简答题
42.枯草杆菌蛋白酶(相对分子质量27600)是一种能催化某些氨基酸酯和酰胺水解的细菌蛋白酶。对于合成的底物N一乙酰一L一酪氨酸乙酯(Ac一Tyr一OEt)，枯草杆菌蛋白酶的Km与Kcat分别是150 mol／L和550 s-1。
(1)当枯草杆菌蛋白酶的浓度是0．40 g/L时，Ac一Tyr一OEt水解的Vmax是多少?
(2)吲哚是枯草杆菌蛋白酶的竞争性抑制剂，抑制常数K1为0．05 mol／L，当吲哚为6．25 mmol／L时，计算Ac一Tyr一OEt被0．40 g/L枯草杆菌蛋白酶水解的Vmax。
(3)计算0．40 g／L枯草杆菌蛋白酶与0．25 mol／L的Ac一Tyr一OEt和1．0 mol/L吲哚共同存在时的V0。
(1)当枯草杆菌蛋白酶的浓度是0．40 g/L时，Ac一Tyr一OEt水解的Vmax是多少?
(2)吲哚是枯草杆菌蛋白酶的竞争性抑制剂，抑制常数K1为0．05 mol／L，当吲哚为6．25 mmol／L时，计算Ac一Tyr一OEt被0．40 g/L枯草杆菌蛋白酶水解的Vmax。
(3)计算0．40 g／L枯草杆菌蛋白酶与0．25 mol／L的Ac一Tyr一OEt和1．0 mol/L吲哚共同存在时的V0。
【正确答案】(1)首先计算枯草杆菌蛋白酶的浓度，然后计算Vmax。
[E]=(0．40 g／L)／(27600g/mol)=1．45×10-5mol／L
Vmax=Kcat.[E]=8．0×10-5mol／(L.s)
(2)由于吲哚是竞争性抑制剂，因此对于该酶催化的反应在有无抑制的条件下，Vmax是相同的。应注意到，在竞争性抑制的速度方程中和在双倒数作图中，Vmax都不受[I]的影响，因此Vmax为8．0×10-3 mol／(L.s)
(3)利用竞争性抑制作用的速度方程
[E]=(0．40 g／L)／(27600g/mol)=1．45×10-5mol／L
Vmax=Kcat.[E]=8．0×10-5mol／(L.s)
(2)由于吲哚是竞争性抑制剂，因此对于该酶催化的反应在有无抑制的条件下，Vmax是相同的。应注意到，在竞争性抑制的速度方程中和在双倒数作图中，Vmax都不受[I]的影响，因此Vmax为8．0×10-3 mol／(L.s)
(3)利用竞争性抑制作用的速度方程
【答案解析】