如何通过实验的方法分析CTD上S2和S5不同磷酸化模式的功能?
 
【正确答案】(1)实验原理 CTD是RNA聚合酶Ⅱ的最大亚基的羧基末端结构域,CTD中的7元重复序列(Y1S2P3T4S5P6S7)上的S2和S5是蛋白质的主要磷酸化位点。 ①在转录起始阶段,CTD上S5磷酸化是形成转录起始复合物的必要前提,还有利于募集加帽酶,促进mRNA加帽过程顺利进行。 ②在转录延伸阶段,磷酸化S5逐步去磷酸化,S2逐步转化为磷酸化形式,S2的磷酸化有助于在转录终止过程中确保3'RNA加工过程顺利进行。 (2)实验方法 ①构建针对于S2和S5的磷酸化过程相关酶的特异性缺失突变体作为实验组,并设立对照组。 ②通过检测实验组和对照组mRNA转录过程以及观察mRNA形态的改变过程,来检测不同的磷酸化模式的功能。
【答案解析】