结构推理 简述DNA shuffling技术的要点。
【正确答案】1994年美国的stemmer提出一个全新的人工分子进化技术,即DNA shuffling(又称体外同源重组技术),该技术可在短的实验循环中定向筛选出特定基因编码的酶蛋白活性提高几百倍甚至上万倍的功能性突变基因。其基本原理是先将来源不同但功能相同的一组同源基因,用DNA核酸酶I进行消化产生随机小片段,由这些随机小片段组成一个文库,使之互为引物和模板,进行PCR扩增,当一个基因拷贝片段作为另一个基因拷贝的引物时,引起模板转换,重组因而发生,导入体内后,选择正突变体作新一轮的体外重组。一般通过2—3次循环,可获得产物大幅度提高的重组突变体。
【答案解析】