结构推理 概述蛋白质一级结构测定的一般程序。
【正确答案】蛋白质一级结构测定的一般程序为:①测定蛋白质(要求纯度必须达到97/%以上)的相对分子质量和它的氨基酸组成,推测所含氨基酸的大致数目。②测定多肽链N-末端和C-末端的氨基酸,从而确定蛋白质分子中多肽链的数目。然后通过对二硫键的测定,查明蛋白质分子中二硫键的有无及数目。如果蛋白质分子中多肽链之间含有二硫键,则必须拆开二硫键,并对不同的多肽链进行分离提纯。③用裂解点不同的两种裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分别将很长的多肽链裂解成两套较短的肽段。④分离提纯所产生的肽段,用蛋白质序列仪分别测定它们的氨基酸序列。⑤应用肽段序列重叠法确定各种肽段在多肽链中的排列次序,即确定多肽链中氨基酸排列顺序。⑥如果有二硫键,需要确定其在多肽链中的位置。
【答案解析】