实验题

细胞划痕实验是指将细胞培养在培养皿或平板上,待细胞融合后用细胞刮在中央区域画一条线,这条线内的细胞被机械力去除掉了,然后将细胞继续培养,观察细胞向无细胞的划痕区域迁移的情况,来判断细胞的迁移能力。某课题组,为研究mTOR基因对肿瘤迁移能力的影响,以敲减细胞中mTOR基因为实验组,对照正常细胞进行划痕实验,结果如下图:
依据上述信息后,请作答:

问答题

何为基因敲减(gene knock-down) ?

【正确答案】

基因敲减,即基因敲除,就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。此法可产生精确的基因突变,也可正确纠正机体的基因突变。

【答案解析】
问答题

mTOR 在肿瘤细胞的迁移能力上有何影响,依照该影响请预期初期肿瘤患者与晚期患者的肿瘤细胞中 mTOR 基因表达的高低情况。

【正确答案】

从图中可以看出,当敲减 mTOR 基因 48 小时之后,实验组相对与对照组,肿瘤细胞迁移能力明显降低,这说明 mTOR 基因能否促进肿瘤的迁移。由于肿瘤转移能力的是恶性肿瘤相对于良性肿瘤的最重要的特征,因此可以初步推断初期肿瘤患者 mTOR 表达量低于晚期肿瘤患者。

【答案解析】
问答题

已知雷帕霉素为 mTOR 的抑制剂,请对加入雷帕霉素处理的细胞进行划痕实验的结果进行预期,并试述原因。

【正确答案】

由于雷帕霉素为 mTOR 抑制剂,因此当给两组同时加入雷帕霉素,4 小时之后观察,可能会看到对照组肿瘤细胞由于受到抑制迁移数目大量减少,而实验组由于敲除 mTOR 基因,抑制剂对其作用不大,因此对照组细胞迁移数目接近于实验组。

【答案解析】