问答题
40. 酶纯化实验中,通常先用(NH4)2SO4作为分级沉淀剂,再用Sephadex G-25凝胶柱层析法从沉淀酶液中除去(NH4)2SO4。请问:
问答题
(1)与其他中性盐沉淀剂相比,用(NH4)2SO4,作沉淀剂有何优点?
【正确答案】硫酸铵具有溶解度大、温度系数小、对酶活力影响小和利于分离等优点。
【答案解析】
问答题
(2)如发现柱层析后酶的总活性较纯化前明显升高,可能的原因是什么?
【正确答案】纯化前酶液中可能含有酶抑制剂。
【答案解析】
问答题
(3)柱层析时,湿法装柱的注意事项主要有哪些?
【正确答案】 注意事项:
①层析柱应与水平面垂直。
②柱床体积至少是上样体积的3倍以上。
③层析介质中不能出现气泡和断层。
④柱床表面要平整,并保有一定的水位。
【答案解析】