结构推理 何谓中间产物学说?有哪些证据可以说明ES中间复合物的存在?
【正确答案】大量实验证明,酶促反应分两步进行。酶(E)与底物(S)反应前,首先形成一个不稳定的中间复合物(ES),然后再分解为产物(P)并放出酶。如下所示:
   S+E→ES→E+P
   酶催化底物形成产物的过程,其关键步骤是底物的化学键断裂和新的化学键的形成。由于酶与底物首先形成中间复合物ES,酶的构象受底物分子的诱导会发生明显的改变;同时酶中的某些基团可以使底物分子内敏感键中的某些基团更易于发生反应,甚至使底物分子发生形变,从而形成一个相互契合的酶一底物复合物。处于这种状态的化合物反应活性很高,很容易变成过渡态,因此反应的活化能大大降低。
   ES复合物存在的证据:①底物和酶的复合物可直接用电镜观察;②复合物的溶解度和稳定性有所变化;③根据酶和底物反应前后的光谱变化,可证明其存在,如大肠杆菌色氨酸合成酶,催化丝氨酸和吲哚合成色氨酸。该酶具有特征性的吸收光谱,当向酶溶液中加入其中的一个底物如L一丝氨酸,发现该酶的荧光强度明显升高,而加入D-丝氨酸,则无变化。当再加入另一个底物吲哚,酶的荧光强度又会发生变化;④有些复合物可直接分离得到,如乙酰化胰凝乳蛋白酶及D-氨基酸氧化酶和底物复合物的结晶。
【答案解析】