结构推理
polymerase chain reaction technique(PCR)聚合酶链反应技术
【正确答案】又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术,是用于快速增加DNA顺序拷贝数的方法。由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期循环进行,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。由于PcR技术在理论和应用上的跨时代意义,Mullis获得了1993年诺贝尔化学奖。PCR由变性——退火——延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板——引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性——退火——延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4min,2~3h就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
【答案解析】