解释“氨基酸等电点”的含义。“等电聚焦”和“酸碱滴定”哪个方法适合丙氨酸的等电点测定?请简述基本实验步骤。
(1)氨基酸等电点即pI,就是氨基酸分子所带正电荷与负电荷相等(净电荷为零) 时溶液的pH。
(2)酸碱滴定适合丙氨酸等电点的测定,等电聚焦适用于大分子蛋白质的pI测定。
(3)酸碱滴定测定氨基酸等电点的基本实验步骤是:
① 在一组丙氨酸溶液中分别加入等量增加的盐酸,测定溶液pH;
② 在另一组丙氨酸溶液中分别加入等量增加的碱,测定溶液pH。
③ 以pH为纵坐标,以酸、碱加入量为横坐标,绘出滴定曲线。
④ 滴定曲线上将出现两个拐点,它们所对应的pH即丙氨酸的pK1和pK2。
⑤ 利用公式pI=1/2(pK1+pK2)即可计算出丙氨酸的pI值。