细胞周期时间是如何测定的?
 
【正确答案】常用的细胞周期时间测定方法包括: (1)脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 这是一种测定细胞周期时间的常用方法,适用于细胞种类构成相对简单、细胞周期时间相对较短、周期运转均匀的细胞群体。该方法的测定过程如下: ①用3H-TdR对测定细胞进行脉冲标记,定时取材并利用放射自显影技术显示标记细胞,统计标记的有丝分裂细胞的比例(PLM),以标记后的时间为横坐标,以标记的有丝分裂细胞的比例为纵坐标,通过读图测定细胞周期,一般常采用半高度读数法。 ②一个细胞群体中细胞周期时间(Tc)和各时相不尽相同,第一个峰常达不到100%,以后的峰会发生衰减,PLM不一定会下降到零。所以实际测量时,常以的方式求出TM。 (2)流式细胞仪测定法 当细胞分别处于G1、S、G2、M期时,其细胞内的DNA含量不同。利用流式细胞仪可以测定单个细胞内的DNA含量。该方法的测定过程如下: ①应用某些药物对细胞进行处理,将细胞抑制在细胞周期的某个特定时期; ②将细胞从抑制状态中释放出来,所有细胞将会同步运转,在不同时段应用流式细胞仪分别测定这些细胞内的DNA含量,以释放后的时间为横坐标,单个细胞内DNA含量为纵坐标作图,通过读图可以求出G1、S、G2、M期时间的长短。 (3)其他方法 ①通过显微缩时摄像技术可以求出分裂间期和分裂期的准确时间; ②通过在不同的时间对细胞群体进行计数,可以推算出细胞群体的倍增时间,即细胞周期的总时间。
【答案解析】