结构推理 DNA聚合酶Ⅰ在基因克隆中的作用。
【正确答案】DNA聚合酶Ⅰ是从大肠埃希菌中发现的第一个DNA聚合酶,分子量为109kD。它能以DNA为模板,以4种脱氧核苷酸为原料(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)以及Mg2+的参与下,在引物的游离3'-OH或缺口的3'端上合成DNA,方向是5'→3'。该酶将与模板配对的相应脱氧核苷酸连接在引物的3'-OH上,形成3',5'磷酸二酯键。这个酶除有5'→3'聚合酶活性外,尚有3'→5'及5'→3'核酸外切酶活性。由于它具有5'→3'核酸外切酶活性,当用缺口平移法(nick translation)标记DNA探针时,常用DNA聚合酶Ⅰ。
【答案解析】