【正确答案】灭菌杀灭目标范围内所有微生物的方法。包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。分物理灭菌法和化学灭菌法。
一、物理消毒灭菌法的应用范围及注意事项。
1．热力灭菌法
多数无芽孢细菌经55℃～60℃作用30～60分钟后死亡。湿热80℃经5～10分钟可杀死所有细菌繁殖体和真菌。细菌的芽孢对高温有很强的抵抗力，例如：炭疽芽孢杆菌的芽孢可耐受5～10分钟煮沸，肉毒梭菌的芽孢则需煮沸3～5小时才死亡。
热力灭菌法分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。这是因为：①含水分的菌体蛋白易凝固；②水蒸汽穿透力比干热强，传导快；③蒸汽凝成水时可释放出潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度。
(1)干热灭菌法：80℃～100℃经1小时可被杀死；芽孢则需160℃～170℃经2小时才死亡。常用的方法有：焚烧、烧灼、干烤。
(2)湿热灭菌法
①巴氏消毒法：一般加热至61.1℃～62.8℃，30分钟或71.7℃，15～30秒，杀灭液体中的病原菌或特定微生物，用于酒类和牛乳的消毒。
②煮沸法；一般细菌的繁殖体5分钟能被杀死，细菌芽胞常需煮沸1～2小时才被杀灭。此法常用于食具等的消毒。水中加入2%碳酸钠，即可提高沸点至105℃，既可促进芽孢的杀灭，又可防止金属器械生锈。
③流动蒸汽消毒法：一般温度不超过100℃，细菌繁殖体经15～30分钟可被杀灭，但芽孢常不被全部杀灭。
④间歇蒸汽灭菌法：适用于不耐高温的营养物，将需灭菌物品置于流通蒸汽灭菌器内，60℃～100℃中加热15～30分钟，杀死其中的繁殖体，但芽孢尚有残存。取出后置培养箱中37℃过夜，使芽孢发育成繁殖体，次日再蒸1次，如此重复3次，一般可杀死所含的芽孢，达到灭菌目的。
⑤高压蒸汽灭菌法：是一种最有效、最常用的灭菌方法。在103.4kPa(1.05kg/cm²)蒸气压下，温度达到121.3℃，维持15～30分钟，可杀灭包括细菌芽孢在内的所有微生物。可用于耐高温、耐湿热物品的消毒灭菌。
2．辐射杀菌法
(1)紫外线：波长200～300nm的紫外线(包括日光中的紫外线)具有杀菌作用，其中以265～266nm的紫外线杀菌力最强。紫外线主要杀菌机制是作用于DNA，使DNA链上两个相邻的胸腺嘧啶以共价键结合形成二聚体，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的变异或死亡。紫外线释放的能量较低，故穿透力较弱，故只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒或不耐热物品的表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤和眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。
(2)电离辐射：具有很高的能量穿透力，包括高速电子、X射线和γ射线等，可产生极强的致死作用。如⁶⁰Co照射常用于一次性医用塑料制品、食品或药品等不耐热物品的消毒。
(3)微波：微波是一种波长为1mm到1m左右的电磁波，多用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品用具、药杯等的消毒。
(4)红外线：是一种0.77～1000μm波长的电磁波，照射到物体表面产生热效应，利用红外线烤箱灭菌所需的温度和时间亦同于干烤。此法多用于医疗器械的灭菌。
3．滤过除菌法
所用的器具是滤菌器(filter)。一般除菌滤膜的孔径为0.22μm，可除去绝大多数细菌，但不能除去病毒、支原体和L型细菌等。
二、化学消毒剂灭菌时，影响消毒剂作用的因素。
1．消毒剂的性质、浓度与作用时间：各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用有异。同一种消毒剂的浓度不同，其消毒效果也不同。绝大多数消毒剂在高浓度时杀菌作用大，当降低至一定浓度时只有抑菌作用。但醇类例外，70%乙醇或50%～80%异丙醇的消毒效果最好。消毒剂在一定浓度下，对细菌的作用时间愈长，消毒效果也愈好。
2．微生物的种类与数量：不同微生物对不同化学消毒剂的敏感性不同，微生物对消毒剂的敏感性高低排序大致如下：真菌、细菌繁殖体、病毒、分枝杆菌、细菌芽孢。同一消毒剂对不同微生物的杀菌效果不同，例如：一般消毒剂对结核分枝杆菌的作用比对其他细菌繁殖体的作用差；70%乙醇可杀死一般细菌繁殖体，但不能杀灭细菌的芽孢。
3．温度：消毒剂的杀菌作用实质是化学反应，其反应速度随温度升高而加快。因此，温度升高可提高消毒效果。例如：2%戊二醛杀灭每毫升含10⁴个炭疽芽孢杆菌的芽孢时，20℃时需15分钟，40℃时为2分钟，56℃时仅1分钟即可。
4．酸碱度：消毒剂的杀菌作用受酸碱度的影响。例如戊二醛本身呈酸性，其水溶液呈弱酸性，不具有杀死芽孢的作用，只有再加入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。苯扎溴铵的杀菌作用是pH愈低，杀菌所需药物浓度愈高，在pH3时所需的杀菌浓度较pH9时要高10倍左右。
5．有机物：环境中有机物的存在能够影响消毒剂的效果。病原菌常同排泄物、分泌物一起存在，这些物质如脓、痰可阻碍消毒剂与病原菌的接触，并消耗药品，因而减弱消毒效果。湿度、穿透力、表面张力以及拮抗物质的存在等均可对消毒灭菌的效果产生影响。