问答题 试述放射自显影的基本原理,并列举实验说明此项技术在细胞生物学研究中的用途。
【正确答案】基本原理占4分;举例说明占6分。显微放射自显影技术可对细胞代谢过程中物质合成运输进行定性、定位和失踪研究。例如:细胞核中DNA、RNA合成的研究;细胞周期各时相的研究;分泌蛋白的合成、运输;糖蛋白的合成(上面至少回答两个方面)。
   以下以分泌糖蛋白合成运输为例说明:
   用放射性核素标记实验,追踪3H标记的亮氨酸。
   3H-亮氨酸→动物体的胰腺组织,3分钟脉冲标记。
   ↓
   制作电镜放射自显影片发现3H-亮氨酸首先出现在RER
   在这之后,注射未标记亮氨酸↓  17分钟后
   制作电镜放射自显影片发现3H-亮氨酸开始出现在Golgi体及附近小泡上
   ↓117分钟后
   制作电镜放射自显影片发现3H-亮氨酸出在酶原颗粒及胞外分泌物中
   或者将3H-葡萄糖注入鼠体,分期制作切片标本。放射自显影显示银颗粒依次出现在Golgi囊和小泡中;粘液糖蛋白中;排到肠腔中。
【答案解析】