单选题
  • A.酵母双杂交法
  • B.聚合酶链反应
  • C.DNA末端合成终止法
  • D.染色体免疫沉淀法
单选题 加测蛋白质以蛋白质相互作用时
【正确答案】 A
【答案解析】目前常用的研究蛋白质与蛋白质相互作用的技术包括酵母双杂交法、各种亲和分离分析、FRET效应分 析、噬菌体显示系统筛选等。
单选题 测定DNA与蛋白质相互作用时
【正确答案】 D
【答案解析】[解析] 酵母双杂交系统可以进行两个蛋白质相互作用分析,可用一个已知的蛋白分子(诱饵蛋白)区钓取与其结合的蛋白,也可进一步验证两个蛋白的相互作用。该系统利用了酵母的生长转录因子GAL4含有的两个结构域,DNA结合域(BD)及转录激活域(AD),将已知基因(诱饵基因)和靶基因或含有靶基因的cDNA分别构建在含BD及AD质粒载体上,当这两种质粒共同转化酵母感受态细胞,若BD结合的诱饵蛋白能够与AD结合的靶蛋白或文库中某些cDNA编码的蛋白相互作用、彼此间结合时,则会导致位于侧翼的BD与AD在空间上接近,呈现GAL4转录因子的完全活性,启动下游的报告基因如His及LacZ等基因的表达,从而在特定的缺陷培养基上生长。因此,利用酵母双杂交系统能够筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白,还可以研究已知蛋白间的相互作用。
染色体免疫共沉淀是一种可在体内用来确定与某一特定蛋白结合或者蛋白定位所在的特异性DNA序列的技术,是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。也称为结合位点分析法。