结构推理
下述每组混合物分别用正丁醇-醋酸-水系统进行纸层析。指出每组中各组分的相对迁移率(假定水相的pH为4.5)。(1)Val和Lys;(2)Phe和Set;(3)Ala、Val和Leu;(4)Glu和Asp(5)Tyr、Ala、Ser和His;(6)Lys-Lys和Lys;(7)Cys-Cys-Ser和Ala-Ala-Ser。
【正确答案】纸层析的流动相是非极性的有机溶剂,而固定相则是滤纸吸附的水。氨基酸或小肽的侧链非极性越强,与固定相的作用力越小,迁移速度越大;反之,侧链的极性越强,与固定相的作用力越大,迁移的速度就越小。因此,迁移的速度的顺序是:(1)Val>Lys;(2)Phe>Ser;(3)Leu>Val>Ala;(4)Glu>Asp;因Glu的侧链的疏水性相对比Asp大,而且Glu的侧链在该pH下的解离程度比Asp小。(5)Tyr>Ala>ser≈His;Tyr侧链虽含有-OH,但此时未电离,并且侧链的大部分是非极性的苯环;Ala的侧链只是一个甲基,非极性相对小些,故Tyr>Ala;Ser的侧链小,并含有极性的-OH,His的侧链此时已大部分质子化,这两种氨基酸与固定相的结合力较大,因而它们迁移的速度小于Ala,且两者的迁移速度基本相等。(6)Lys-Lys的迁移速度与Lys几乎相同;尽管Lys-Lys在此时质子化程度较高,与固定相的作用力较大,但分子侧链的非极性部分增高,因此出现这样的结果。(7)Ala-Ala-Ser迁移速度大于Cys-Cys-Ser,因为后者的氨基酸残基R基均有较强的极性。
【答案解析】