问答题 试述显示细胞内DNA和碱性磷酸酶的原理和方法。
【正确答案】特异显示细胞中DNA的组织化学方法是Feulgen反应,此方法是由Feulgen和Rossenbeck于1924年创立的,其原理是:材料经烯酸(1mol/L盐酸、60℃)水解DNA,破坏嘌呤碱和去氧核糖之间的糖苷键,在脱氧核糖的第一个碳原子上形成游离的醛基,醛基与Schiff试剂(无色亚硫酸品红)结合,形成紫红色化合物,通过显微分光光度法或比色法对颜色强度进行测定,可对组织或溶液中的DNA含量进行定量分析;检测碱性磷酸酶的方法是Gormori方法,此法用甘油的磷酸酯作底物,由于酶的水解释放磷酸根离子,在钙离子存在下转变成不溶性磷酸钙,然后使磷酸钙转变成金属银、硫化铅、硫化钴或其他有颜色的化合物,就可观察钙盐的存在部位,即碱性磷酸酶的活性部位。
【答案解析】