【正确答案】影响转化效率的因素有：
   (1)感受态细菌的基因型：recA基因缺失的菌株比未缺失的转化效率较高，Crp^-(能特异影响转化效率的基因)基因型的转化效率要比Crp⁺基因型的感受态高出很多。
   (2)菌株的生长条件：从-70℃冰箱中细菌保种管中取出的细菌直接划平板，再转至液体培养基中培养所制备的感受态转化效率最高。不应使用实验室连续传代或贮存于4℃或室温的培养物。致敏前，应收获对数期或对数生长前期的细菌进行感受态的制备(OD₆₀₀值为0.3～0.4)。
   (3)转化缓冲液：
   ①试剂的纯度：尤其是氯化钙(CaCl₂)，同一厂家不同批次的产品，其致敏感受态细胞的转化效率也存在一定区别，因此，务必使用能够得到的最高质量的试剂(以进口试剂为最佳)，分装成小份，4℃避光保存。
   ②pH值：pH＞8或pH＜4时，得不到任何转化子，pH4～8时，转化效率呈钟形曲线，峰值约为6.4～6.8，中性或偏弱酸性。
   ③阳离子：二价阳离子，常见：Mg²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺、Co²⁺等。
   Zn²⁺：较低浓度时无转化诱导功能。
   Mg²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺：低浓度时十分有效。
   Mg²⁺在一个较大的浓度范围内均能保持一个较高的转化效率(20～50μmol/L)。
   PEG(3350、8000)：10/%时，可提高转化效率，＞20/%、＜5/%时，无诱导作用。
   ④冻存保护剂：10/%甘油。使细胞在冻存过程中防止冰晶的形成而损伤细胞活性，但甘油可使转化效率降低约30/%。5/%～7/%DMSO。能使转化效率提高，但需在液氮中保存。
   (4)转化步骤：
   ①DNA量：10pg～1ng变化不大；＞10ng，则转化效率大大降低。DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5/%，50μl感受态细胞通常可被1ng超螺旋质粒DNA所饱和。
   ②冰浴时间：要求不严，5分钟至1小时均可。甚至在质粒转化时可省略此步。
   ③热冲击时间：时间不是很严，最佳为42℃30秒。也可不热休克，而将平板置于37℃预热。
   ④复苏时间：要求不严。质粒转化时，可省略此步，直接铺板。
   (5)质粒分子量大小：4～7.3kb，转化效率基本一致。分子量增大，转化效率下降，但可满足常规的基因克隆及文库构建。较大质粒，可将质粒先用DNA解旋酶处理，可提高转化效率。
   (6)其他因素
   玻璃和塑料器皿的清洁度：痕量去污剂或其它化学物质的存在可能大大地降低细菌的转化效率，因此，所用的物品均必须清洗干净并进行高压灭菌。
   玻璃管：可使转化效率大大降低。
   LB培养基：营养成分低，用加富培养基可提高转化效率。
   体系中的T4 DNA连接酶：将其加热失活后，可提高转化效率。
   (7)注意操作，防止杂菌污染。