单选题图4是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1，2，3，4，5。下列操作方法正确的是( )。

【正确答案】 D

【答案解析】解析：划线操作在火焰边上进行而不是火焰上，A项错误；5个区域都能得到所需菌落，B项错误：操作前将接种环放在火焰上灼烧灭菌而不是火焰边，C项错误。在1，2，3，4，5区域中划线前后都要对接种环灭菌，D选项正确。