结构推理
某实验室分离纯化了一个DNA甲基化转移酶,当用裸露的DNA做底物时,几乎测不到甲基转移酶活性。当在反应体系中加入组蛋白H2A、H2B、H3和H4后,测到了明显的甲基转移酶活性。你认为该实验结果中,甲基转移酶活性升高的原因是什么?你将用什么实验证你的推理?
【正确答案】DNA甲基化转移酶的结合位点可能存在组蛋白上,通过与组蛋白的结合,激活甲基化转移酶的活性,从而使DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶。证明DNA甲基化转移酶和组蛋白特异性结合可采用蛋白质亲和层析、酵母双杂交或免疫共沉淀等研究蛋白质互作的方法。例如采用酵母双杂交的方法,将组蛋白与酵母转录因子的DNA结合结构域结合,DNA甲基化转移酶与酵母转录因子的转录激活结构域结合,制备双杂交系统,如果可检测到报告基因的表达则说明DNA甲基化转移酶与组蛋白结合了,反之则推论错误。
【答案解析】