问答题 随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)标记中应用的PCR技术原理与经典的PCR反应有何区别?
【正确答案】(1)引物不一样,经典的PCR反应所用的引物一般长度为20bp左右的特异性引物,而RAPD所用的引物仅为一个10bp随机引物。(2)退火温度不同,经典的PCR复性温度较高,一般为55~60℃,而RAPD的复性温度较低,为36℃左右。(3)扩增片段表现的特异性程度不同,由于经典的PCR技术的引物较长,退火温度高,引物与模板之间的结合较稳定,从而扩增片段表现为特异性扩增,扩增产物的准确性高。而RAPD采用较短的随机单引物和低退火温度,使得引物与模板间的结合不稳定,同时允许适当的错配,导致扩增产物为随机扩增,扩增产物的准确性低。
【答案解析】