问答题 延胡索酸脱氢酶受琥珀酸的抑制,根据加抑制剂(5×10-2mol/L)后反应速度如下表,用作图法判断抑制作用的类型,分别求米氏常数和最大反应速度。
   
延胡索酸浓度(mol/L) 无I 加I反应速度v(任意单位)
5×10-5 1.00 0.57
1×10-4 1.50 0.95
2×10-4 2.00 1.40
5×10-4 2.50 2.13
【正确答案】①米氏方程:v=Vmax[S]/(Km+[S])根据Lineweaver-Burk作图法,将表中的数据换成mmol/L,并将v和[S]取倒数(v-1,[S]-1),列表如下:
   
[S]-1(mmol/L-1) v-1(无抑制) v-1(加琥珀酸50mmol/L)
20 1 1.75
10 0.666 1.05
5 0.5 0.714
2 0.4 0.47

   ②用表中[S]-1分别对无抑制剂及加琥珀酸的v-1按Lineweaver-Burk作图法作图,求Km及Vmax
   从你自己的图中看出无抑制剂-1/Km=-10,Km=0.1,有抑制剂时Km=0.2,Vmax=3.33,加抑制剂只改变了Km,增大了Km,而Vmax未变,说明属竞争性抑制。
【答案解析】