问答题
解释Km含义和物理意义。如果用双倒数作图法测定一种酶的Km,如何设计实验和分析结果?其根据是什么?
【正确答案】(1)Km即米氏常数,其物理意义是酶促反应速度达到最大速度一半时底物的浓度,单位是mol/L。Km为酶的特征常数。不同的酶,其Km值不同。Km值表示酶与底物的亲和力,Km值越大,表明酶与底物的亲和力越小。
(2)实验设计与结果分析:在一定酶浓度下,分别测定一系列底物浓度[S]时酶的反应初速度(v0值),获得一组v0-[S]的实验数据。取倒数作图,以1/v0为纵坐标,以1/[S]为横坐标,即可获得一条直线。在图上,直线斜率为Km/Vmax,在纵轴上的截距为1/Vmax。由此可知直线在横轴上的截距X=-1/Km。测出X,即可求出Km和Vmax。
(3)根据:米氏方程的双倒数方程。
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【答案解析】