结构推理
已知动物细胞中含有actin基因,如何证明蚕豆细胞基因组中是否存在actin基因?若存在,如何证明该基因在染色体上的位置?
【正确答案】证明:①DNA探针的制备:从动物细胞中分离actin基因,用放射性放射性核素进行标记作为探针;②Southern杂交:从蚕豆细胞匀浆中分离核酸,用琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段,再通过印迹转移到硝酸纤维素膜上,将膜上的DNA进行变性处理,加入放射性DNA探针进行杂交;③放射自显影分析:在膜上涂布乳胶、曝光、显影、定影,通过银粒的出现与否确定蚕豆基因中是否存在actin基因。
如果存在:①制备蚕豆细胞染色体:取蚕豆根尖用秋水仙素处理,固定,纤维素酶和果胶酶酶解,制片;②原位杂交:将染色体制片中的DNA变性处理,并与放射性DNA探针进行杂交;③放射自显影分析:在制片上涂布乳胶、曝光、显影、定影,染色;④显微镜观察,根据银粒出现的部位确定ctin基因在蚕豆染色体上的位置。
【答案解析】