结构推理 DNA复制时双链是如何解开的?比较类型Ⅰ和类型Ⅱ拓扑异构酶的作用特点和生理功能。
【正确答案】DNA复制起始的体外实验表明有6种蛋白:Dna A、Dna B、Dna C、HU(类组蛋白)、SSB(单链结合蛋白质)、旋转酶、形成起始复合物。
   Dna A单体首先结合到复制起始点上4个含9 bp的重复序列上。然后20~40个Dna A单体结合到复制起始点形成一个核心。在Dna A蛋白的作用下,位于起始复制点右侧的3个含13 bp的重复序列开始解旋形成开放复合体。
   Dna B\Dna C在复制起始区充当了起始的引发体。Dna B-Dna C复合体转变为Dna B六聚物,形成复制叉。Dna B提供解旋酶活性,使DNA解旋,可能是它识别复制叉上潜在的单链结构,从13 bp的重复序列上取代Dha A,并开始解旋。Dna B在复制起始区域以很少的量起催化作用,并且具有激活Dna G引发酶的能力。
   解旋反应还需要另外两种蛋白:旋转酶和SSB。旋转酶即TopoII,其作用是解旋,即让一条链绕着另一条链解旋,SSB使已经形成的单链处于稳定状态。
   拓扑异构酶Ⅰ,将环状双链DNA的一条链切开一个口,切口处链的末端绕螺旋轴按照松弛超螺旋的方向转动,然后再将切口封闭。拓扑异构酶Ⅰ不依赖ATP。
   拓扑异构酶Ⅱ,切开环状双链DNA的两条链,非断裂双链通过断裂末端,然后断裂切口封闭,在ATP作用下将DNA从松弛状态转变为负超螺旋,为DNA分子解旋后进行复制及转录做好准备。
【答案解析】