结构推理 什么是蛋白质变性?有哪些因素可使蛋白质变性?变性蛋白质有哪些表现?用哪些方法可以检测蛋白质是否变性?
【正确答案】天然蛋白质在变性因素作用之下,其一级结构保持不变,但其高级结构发生了异常的变化,即由天然态(折叠态)变成了变性态(伸展态) ,从而引起了生物功能的丧失,以及物理、化学性质的改变。这种现象,被称为变性。 变性因素是很多,其中物理因素包括: 热(60~100℃)、紫外线、X 射线、超声波、高压、表面张力,以及剧烈的振荡、研磨、搅拌等;化学因素,又称为变性剂,包括:酸、碱、有机溶剂(如乙醇、丙酮等)、尿素、盐酸胍、重金属盐、三氯醋酸、苦味酸、磷钨酸以及去污剂等。不同的蛋白质对上述各种变性因素的敏感程度是不同的。 变性蛋白质主要有以下的表现: (1)物理性质的改变:溶解度下降,有的甚至凝聚、沉淀;失去结晶的能力;特性粘度增加;旋光值改变;紫外吸收光谱和荧光光谱发生改变等。 (2)化学性质的改变: ①变性以后被蛋白水解酶水解速度就增加了,水解部位亦大大增加了,即消化率提高了;②在变性之前,埋藏在蛋白质分子内部的某些基团,不能与某些试剂反应,但变性之后,由于暴露在蛋白质分子的表面上,从而变得可以与试剂反应了;③生物功能的改变,抗原性的改变;生物功能丧失。 蛋白质变性的鉴定方法: (1)测定蛋白质的比活性。(2)以天然蛋白质作对照、测定蛋白质物理的变化。(3) 测定蛋白质化学性质的变化。(4)用免疫法测定蛋白质的抗原性是否改变,抗体能否与抗原专一性结合。(5)观察蛋白质的溶解度是否下降,是否凝集、沉淀等。 检查蛋白质变性的情况,往往采用多种方法,最后,综合其结果,才能得到确切的结论。
【答案解析】