【正确答案】①不可行。 ②SDS-PAGE为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,在电泳样品制备过程中需要添加SDS和巯基乙醇,属于变性电泳。SDS即十二烷基硫酸钠,是一种蛋白质变性剂,它可以破坏蛋白质分子中的氢键和疏水作用;巯基乙醇是还原剂,可以破坏二硫键。在巯基乙醇存在下,SDS使蛋白质复合体中的各亚基分离,并且亚基多肽链充分展开,故SDS-PAGE只能分离蛋白质亚基。 ③凝胶过滤柱层析、密度梯度超离心等可用于分离蛋白质复合体。
【答案解析】SDS-PAGE;蛋白质亚基;天然蛋白质分离。 这个题提到基因克隆、生物信息学分析,这些都不是考点。实际上,是“为什么可以用SDS-PAGE测定蛋白质亚基分子量”、“比较SDS-PAGE与凝胶过滤柱层析技术应用特点”的另一种变形考题。除了凝胶过滤柱层析、密度梯度超离心外,其他的生物化学方法如非变性凝胶电泳、免疫共沉淀等都可以用于分离蛋白质复合体。