结构推理 论述化学降解法测序的特点。
【正确答案】化学降解法进行测序不仅重复性更高,而且只需要简单的化学试剂和一般的实验条件,易为普通实验室和研究人员所掌握。Maxam-Gilbert法可对合成的寡核苷酸进行测序,可以分析DNA甲基化修饰情况,还可以通过化学保护及修饰等干扰实验来研究DNA的二级结构和DNA与蛋白质的相互作用,这些仍然是Maxam-Gilbert法所独具的鲜明特点。当然,如同双脱氧终止法一样,化学降解法测序的主要限制因素也是测序凝胶的分辨能力。化学测序法一般都用强P标记,所以与用”S作标记的末端终止法相比,它显示的条带较宽且有扩散现象,这限制了化学降解法在对较大DNA片段测序时的分辨能力。一般一块电泳胶上最多能读出200~250个核苷酸序列。然而,如果按2个相反的取向分别从DNA片段的两端进行测序,则可克服这一不足。
【答案解析】