简述染色质免疫共沉淀(ChIP)技术原理与基本过程。
 
【正确答案】(1)染色质免疫共沉淀技术的原理 在生理状态下固定细胞内的蛋白质-DNA复合物,通过超声或酶处理将染色质随机切断为一定长度范围内的小片段,利用抗原抗体的特异性识别反应沉淀复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,获得该蛋白质与DNA相互作用的信息。 (2)染色质免疫共沉淀技术的基本过程 ①固定。用甲醛处理细胞,使DNA和蛋白质固定在交联状态。 ②用超声波法或酶法等方法处理细胞,获得一定长度范围内的染色质小片段。 ③免疫沉淀。加入目的蛋白的抗体,使其与靶蛋白-DNA复合物结合,形成抗体-靶蛋白-DNA复合物;沉淀抗体-靶蛋白-DNA复合物并进行清洗。 ④目的片段的纯化与检测。得到富集复合物,经热处理解除交联,释放共沉淀的DNA,对纯化富集的DNA-片段进行PCR检测与分析,获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
【答案解析】