结构推理 冷冻蚀刻技术的方法步骤。
【正确答案】冷冻蚀刻技术又称冷冻断裂蚀刻复型技术,主要用于观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构,图形富有立体感,样品不需要包埋和固定,因此能更好的保持样品的真实结构。其主要步骤为:先将标本材料切成1mm×1mm×3mm大小并在液氮中冷冻(-196℃);后放入真空喷镀仪中断裂;断后的切面上有细胞器,其间有冰水,然后加热使冰升华,将水分蒸发掉,使膜内结构暴露出来,此时的切面就成凹凸不平好像“雕刻”的一样,即为“冷冻蚀刻”。然后在真空喷镀仪上以不同的角度向切面喷镀铂、碳颗粒(喷铂一次,间断喷碳3~5次),这样在切面上就形成一层复型膜(称为“冷冻复型”),在这层复型膜上就印下了细胞切面的立体结构。将喷镀后的样品自喷镀仪中取出,放在腐蚀液中将复型膜下的软组织腐蚀掉,再把复型膜置于特制的400目铜网上,干燥后就可在透射电子显微镜下进行观察与分析。
【答案解析】