问答题 Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用?
【正确答案】Ⅰ类限制性内切核酸酶的分子质量较大,一般在300kDa以上,通常由三个不同的亚基所组成。例如,限制性内切核酸酶Eco B是由R(135kDa)、M(62kDa)和S(55kDa)三种亚基组成的复合酶,这三个亚基分别由不同的基因编码。全酶的总分子质量为449kDa,共5个亚基,其中R亚基和M亚基各2分子。
   Ⅰ类酶不仅是一种内切核酸酶,同时在酶分子上还具有甲基化酶和ATPase的活性,所以是具有多种酶活性的复合酶类。作用时除了需要Mg2+作辅助因子外,还要求ATP和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的存在。Ⅰ类酶具有特异的识别序列,大约15个碱基对。Ⅰ类酶虽然能够在一定序列上识别DNA分子,并能同DNA分子作用,因其识别DNA后要朝一个方向或两个方向移动一段距离(通常为1000个碱基左右),并且要形成一个环后才能切割DNA,所以识别位点和切割位点不一致,产生的片段较大,因此在基因工程中作用不大。
【答案解析】