单选题 将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属于______。
   A.同聚物加尾连接    B.人工接头连接    C.平端连接
   D.粘性末端连接    E.非粘性末端连接
【正确答案】 D
【答案解析】[考点]外源基因与载体的主要连接方式。外源基因与载体的主要连接方式主要连接方式如下:(1)粘性末端连接:具体又可以分为两种情况①同一限制酶切位点的连接。由于他们具有完全相同的粘性末端,首先就可以在粘末端单链碱基之间退火,然后由连接酶催化下形成共价键。②不同的限制性内切酶位点连接。如同裂酶或同尾酶切片段之间的连接,由于他们具有相同类型的粘末端,即配伍末端,故也可适用于这种连接方式。(2)平端连接。此时,DNA连接酶可以催化相同或不同限制性内切酶切割的平端之间的连接。需要时也可将粘性末端经特殊酶处理后,使单链突出端被补平或削平,变为平端后再行连接。(3)同聚物加尾连接。利用多聚A或多聚T之间的退火来完成连接。首先在末端转移酶的作用下,在DNA片段末端加上同聚物序列、制造出粘性末端,然后进行连接。这种连接方式也可以看成为一种特殊的粘性末端连接形式。(4)人工接头连接。又称连接子,是指含有某些限制酶切点的寡核苷酸片段,在T4 DNA连接酶的作用下,将接头连接到目的DNA片段的两端,然后再用相应的限制酶切割,使外源DNA片段的两端具有了粘性末端,可以与相应的载体进行连接。
   PstⅠ内切酶切割后产生的是3'粘性末端,所以其连接方式属于粘性末端连接。