【正确答案】(1)细胞培养的基本原理和方法 ①原理 细胞培养是指将从机体中取出的细胞，置于一定的生长基质之中，并给予恒定的培养环境，使这些细胞在体外继续生长和分裂的技术。 ②方法 a．群体培养：将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合后形成均匀的单细胞层。 b．克隆培养：将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，一个集落称为一个克隆。 (2)小白鼠脾细胞的原代培养 首先从健康小白鼠体内取出脾细胞，剪碎，用浓度和活性适中的胰酶或胶原酶与EDTA等将细胞连接处消化分散，给予良好的营养液与无菌的培养环境(接近体温与体内pH)，在培养瓶中进行静止或慢速转动培养。培养液中加一定量的小牛或胎牛血清，有利于细胞的贴壁生长和分裂。 (3)死活细胞比率的判断方法 ①染色法 染色法分为化学染色法和荧光染色法，根据死活细胞细胞膜通透性和代谢性差异，染料或使死细胞着色，或使活细胞着色。可通过染色鉴别细胞的死活，从而确定细胞培养的死亡率或存活率。 ②仪器分析法 可采用微电极技术(利用死活细胞膜两侧电位的差异)、全自动细胞计数分析仪和流式细胞仪等，对细胞的死活进行精确的批量检测。