【正确答案】(1)削减酶切点。
   可以用完全酶切或部分酶切。例如，EcoR Ⅰ在某种质粒载体上有两个切点，一个在抗性基因内，另一个在其他部位。现在要除掉非抗性位点上的切点，可用该酶部分酶解这种质粒，用S1核酸酶削平末端后自连，转化后用原抗性筛选即可。如果EcoR Ⅰ的两个切点都不在抗性基因内，切割后产生的两个片段中有一个是质粒非必需的，则可用完全酶切，自连后筛选，就可筛选到失去一个切点的质粒。
   (2)增加酶切点。
   增加切点有两种方法：第一种方法是利用人工合成的接头，或是利用天然的接头。所谓接头(linker，adapter)是指含有限制性内切核酸酶识别和切割序列的DNA片段。人工接头主要是用化学方法合成的含有限制性内切核酸酶作用序列的DNA片段。
   创造限制性内切核酸酶切点的第二种方法是利用现有的具有多种限制酶切点的DNA片段作为接头。如pSC101质粒上含有多个限制酶的切点(EcoR Ⅰ、HindⅢ、BamH Ⅰ和Sal Ⅰ)，并且这些酶切位点靠得非常近，它们位于一段长约800个核苷酸之内的DNA片段上。如果用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ将这种片段切下来，就可以得到含有EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ、BamH Ⅰ及Sal Ⅰ四个切点的片段。根据载体的情况，可将该接头插入到质粒上，便可增加切点。