问答题
已知某蛋白质由二条肽链组成。你是否能设计一个简便的实验,用来判断二条肽链之间是以共价键相连的,还是以非共价键相连的。
【正确答案】
【答案解析】
判断二条肽链之间是否以共价键相连,就是判断是否有链间二硫键。测定蛋白质中二硫键的经典方法是对角线电泳。此方法先是用专一性适中的蛋白质水解酶,将蛋白质降解为若干片段。随后进行二维纸电泳,在第一向电泳后,用挥发性的还原剂处理,然后进行第二向电泳(电泳条件与第一向相同)。经显色后,在对角线上的肽段均不含有二硫键,而偏离对角线的肽段是形成二硫键的肽段,测定有关肽段的氨基酸组成,即能确定蛋白质肽链中二硫键配对的情况。
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