患者女，36岁。婚后5年未孕，就诊后医生进行了子宫内膜、输卵管、卵泡监测及激素等一系列检测未发现异常，为进一步查找病因，拟行抗精子抗体检测，检验科进行测定时在镜下观察到绿色荧光。
检验科在检测该患者的项目时采用的方法是
间接法(indirect immunofluorescence assay,IFA)是目前最常用的方法。用特异性抗体(一抗)与标本中相应抗原反应，再用荧光素标记的第二抗体(二抗)与抗原抗体复合物中的一抗结合，洗涤，干燥后在荧光显微镜下观察特异性荧光，既可以检测未知抗原，也可以检测未知抗体。
检测样本过程中观察到的绿色荧光可能为何种荧光素，其最大激发波长(nm)及最大发射波长(nm)各为
FITC即异硫氰酸荧光素是应用最广泛的荧光素，其最大激发波长(nm)及最大发射波长(nm)各为490～495和520～530。
作为检验科医务人员，在用显微镜观察该标本的结果时以下均为该注意的事项，除了
荧光染色后一般在1小时内完成观察，时间过长会使荧光减弱。
作为检验科医务人员，在考虑到显微镜对结果观察的影响外，在制备标本过程中也应注意，下列温度对样本的影响，描述正确的是
影响荧光强度的因素包括：增大溶剂的极性，将使荧光强度减弱；荧光物质浓度太高时，会发生自熄灭现象；温度升高时荧光效率降低；溶液的pH改变也会造成影响。