问答题
通过先用核糖核酸酶处理mRNA,然后再将核糖核酸酶失活和清除掉,可制备无mRNA的网织红细胞(未成熟红细胞)裂解物。当在此裂解物中加入mRNA、GTP和氨酰tRNA后,可合成蛋白质。利用这个系统如何阐述蛋白质合成是从N-末端到G末端的?
【正确答案】将已知蛋白质的mRNA添加到裂解物中。在一分钟或两分钟后,加入嘌呤霉素提前终止翻译。分析合成多肽的序列以确定它们是否对应于蛋白质的C-或N末端。或者,将被核素标记的仅出现在蛋白质一个终点附近的一个氨基酸(以氨酰-tRNA)加入到裂解物中,随后检测标记是否整合进了多肽。
【答案解析】