【正确答案】实验方案如下: 实验原理:绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,简称GFP)是一种在美国西北海岸盛产的水母中发现的一种蛋白质。它之所以能够发光,是因在其包含238个氨基酸的序列中,第65至67个氨基酸(丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸)残基可自发地形成一种荧光发色团。因此能够直接看到细胞内部的运动情况,轻易地找出GFP蛋白所处的位置。 (1)本实验中,可以构建含有可以表达该信号分子基因与GFP基因的融合载体,然后将其转化到细胞中。该载体就会在细胞中表达带有GFP蛋白的信号分子。如果该信号分子与细胞膜上的受体蛋白结合,那么就会在细胞膜上观察到发光的GFP蛋白。该实验可以证明已知信号分子的受体确实存在于细胞膜上。 (2)在(1)的方案基础上设立对照实验。 ①以无信号分子结合的正常细胞作为对照组。 ②构建带有可以与信号分子结合但是没有功能的受体片段,与信号分子竞争性结合,从而阻止信号分子与受体的结合。 如果①和②情况下细胞正常分裂,则说明该信号分子是通过与其受体结合抑制了细胞分裂。 (3)注意事项: ①GFP蛋白与已知信号分子融合后可能影响信号分子的构象从而影响信号分子的功能以及与其受体的结合。 ②表达的没有功能的受体片段应该与信号分子具有结合性,同时,需要保证该信号片段大量表达,具有较高浓度,从而可以与信号分子产生竞争性结合。
【答案解析】