【正确答案】（1）核酸分子的浓度与长度：核酸浓度越大，分子数越多，碰撞几率越大，复性速度越快。核酸分子量越大，扩散速度越慢，因而复性速度越慢。（2）温度：温度过高不利于核酸复性，而温度过低，少数碱基配对形成的局部双链不易解离，易产生错配。（3）离子强度：低离子强度时，核酸杂交非常缓慢，离子强度增加，杂交反应增加，但高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定。（4）甲酰胺：甲酰胺能降低核酸杂交的Tm值，有利于同源性不高的待测核酸与探针在低温下杂交，维持其稳定性。（5）核酸分子的复杂性：核酸的复杂性是指存在于反应体系中不同顺序的总长度。Cot1/2与反应体系中核酸复杂性成正比。两个DNA样品浓度绝对一致时，变性后的相对杂交率取决于DNA的相对复杂性。（6）非特异性杂交反应：杂交前封闭非特异性杂交位点，减少其对探针的非特异性吸附。常用的封闭物有非特异性DNA和高分子化合物二类。