结构推理 请论述凯氏定氮法的原理和测定过程中的注意事项。
【正确答案】原理:样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸胺。然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。 注意及说明: 所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制;消化时不要用强火,应保持和缓沸腾;消化过程中应注意不时转动凯氏烧瓶;样品中若含脂肪或糖较多时,消化过程中易产生大量泡沫 ,采取相应的方法预防;若取样量较大,如干试样超过5g,可按每克试样5mL的比例增加硫酸用量;一般消化至呈透明后,继续消化30min即可,但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品,适当延长消化时间;蒸馏装置不能漏气;硼酸吸收液的温度不应超过40 ℃;蒸馏完毕后,应先将冷凝管下端提离液面清洗管口,再蒸1 min后关掉热源;蒸馏前若加碱量不足,消化液呈蓝色不生成氢氧化铜沉淀,此时需再增加氢氧化钠用量。
【答案解析】