【正确答案】PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。(1)污染原因1)标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染；有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。2)PCR试剂的污染：主要是由于在PCR试剂配制过程中，加样枪、容器、双蒸水及其他溶液被PCR核酸模板污染。3)PCR扩增产物污染：这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。还有一种容易忽视、最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。4)实验室中克隆质粒的污染：在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室，因为克隆质粒在单位容积内含量相当高，另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂，而且由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力，在活细胞内的质粒其污染可能性也很大。(2)污染的监测对照试验1)阳性对照：在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照，它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要、选择扩增度中等、重复性好，且经各种鉴定是该产物的标本，若以重组质粒为阳性对照，其含量宜低不宜高(100个拷贝以下)。但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本，其对检测或扩增样品污染的可能性很大。2)阴性对照：每次PCR实验务必做阴性对照。它包括：①标本对照，被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照；被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。②试剂对照，在PCR试剂中不加模板DNA或RNA，进行PCR扩增，以监测试剂是否污染。3)重复性试验：选择不同区域的引物进行PCR扩增。(3)防止假阳性出现的措施1)合理分隔实验室：将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其他步骤严格分开。最好能划分：①标本处理区；②PCR反应液制备区；③PCR循环扩增区；④PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应专用。实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的DNA或RNA。2)吸样枪：由于操作时不慎，将样品或模板核酸吸入枪内或粘上枪头是一个严重的污染源。3)预混和分装PCR试剂：所有的PCR试剂都应小量分装，然后置于－20℃