【正确答案】PCR技术是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。 (1)PCR扩增的原理 ①高温处理DNA分子使之分离成两条单链DNA分子; ②DNA聚合酶以单链DNA为模板,依据碱基互补配对原理,利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的DNA互补链。 (2)PCR扩增的步骤 ①高温变性:DNA解链 反应器经加热至93℃左右,维持一定时间后,模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA分离成为单链,以便与引物结合。 ②低温退火:引物与模板DNA结合 DNA分子经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列进行配对结合。 ③中温延伸:DNA合成 到适宜的温度(70℃左右)时,DNA模板-引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,依据碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。 ④多次循环以上三步 重复循环高温变性一低温退火一中温延伸三个过程,就可获得更多的半保留复制链,且新合成的链又可作为下次循环的模板。
【答案解析】