【正确答案】正确答案：(1)当它们流经DEAE-纤维素阴离子交换树脂时，用线性盐浓度梯度洗脱时，这些蛋白质被洗脱的顺序为A→C→D→B。因为阴离子交换树脂结合带有负电荷的蛋白质，带负电荷越多pI越小，与阴离子交换树脂越容易结合，越不易被洗脱出来，所以pI最大的蛋白质最先被洗脱出来，根据这4种蛋白质的pI大小(A＞C＞D＞B)，则洗脱的顺序为A→C→D→B。 (2)当它们流经Sephadex G-50凝胶层析柱时，这些蛋白质被洗脱的顺序为B→C→A→D。凝胶层析柱是根据蛋白质的蛋白质的分子质量分离的，分子量越大，迁移速度越大，先被洗脱出来，根据这四种蛋白质的分子质量大小(B＞C＞A＞D)，则洗脱的顺序为B→C→A→D。 (3)阴离子交换柱必须要求洗脱物有阴离子的存在，才可进行交换，要使洗脱物存在阴离子，必须在碱性环境下，但是如果pH过大会导致蛋白质稳定性下降，活性的回收率下降。所以一般在蛋白质的离子交换层析中很少用高于9以上的pH，所以7＜pH＜9。