【答案解析】(1)选择一定重量的富含线粒体的材料(如动物心脏)，加入预冷适量pH7.0，0.1mol/L的磷酸缓冲液，放入组织捣碎机内匀浆。破坏细胞膜释放细胞器。
(2)利用细胞器的密度不同，将匀浆分步差速离心获得线粒体。
(3)将线粒体重悬于缓冲液中，用超声波破碎仪破坏线粒体膜。
(4)离心取上清，弃沉淀，分离酶与线粒体膜碎片。
(5)根据柠檬酸合酶的理化性质(分子质量、等电点等)进行纯化：
a．选择合适的硫酸铵溶液进行分步盐析，利用溶解度不同，获取粗分级酶；
b．将盐析后的酶溶解于含1moI/L硫酸铵的pH7.0磷酸缓冲液，上疏水层析柱，以含有1mol/L和0mol/L硫酸铵浓度的缓冲液进行梯度洗脱，利用不同蛋白质的疏水性质不同，脱盐并分离酶；
C．收集上步含有酶活性的洗脱峰，上离子交换层析柱，以含有0mol/L和1mol/L NaCl浓度的缓冲液进行梯度洗脱，利用电荷性质不同分离酶；
d．收集含有酶活性峰的洗脱液，冷冻干燥浓缩，提高样品浓度和减少体积；
e．将浓缩后的酶液上凝胶过滤层析柱，并洗脱，利用分子质量不同分离酶；
f．将上述各处理过程所保留的样品测蛋白含量和酶活性，计算得率、比活力及纯化倍数；
g．用电泳仪将各样品进行SDS-PAGE，检查样品纯度；
h．分析数据，根据得率、比活力、纯度，判断结果，若不能获得纯品，则进一步改进纯化方法，如选择其他分离方法(吸附层析、亲和层析、有机溶剂沉淀等)，以获得纯品。