【正确答案】正确答案:聚合酶链反应是一种体外快速的特定DNA片段扩增技术。Mullis于1985年发明,其基本原理是根据DNA复制机制及DNA在体外随温度发生变性和复性的特点设计的。一个PCR反应包括靶DNA(含目的DNA的样品)、引物(人工合成的与靶DNA的3’端序列互补杂交)、4种dNTP和热稳定的DNA聚合酶等。然后置高温950℃(15~30s)使靶DNA变性解链,反应混合物被迅速冷却(单链DNA与引物结合的退火温度45~550℃),再升高温度置70~750℃左右,由TDNA聚合酶催化引物延伸合成子链。PCR的高温变性一低温退火一适温延伸三步反应反复循环,使靶DNA在两段引物限定范围内的序列以几何级数扩增。聚合酶链反应的应用:①遗传病的诊断;②基因的分离和克隆;③法医和刑侦鉴定;④基因组测序、染色体巡视;⑤cDNA库的建立;⑥DNA重组;⑦基因突变的分析和诱变;⑧癌基因的检测;⑨病原体的检测;⑩基因探针的制备。
【答案解析】