【正确答案】正确答案:首先,对蛋白质全部氨基酸测序。二硫键位置的确定包括链内和链间的位置确定,通过对角线电泳来测,对角线电泳采用纸电泳。用胃蛋白酶水解蛋白质,得到还连着二硫键的多肽产物。 然后,进行第一向电泳,将水解产物点在滤纸上,由于不同多肽段的片段大小和电荷的不同,在电泳过程中被分离开。再用甲酸蒸气使肽段的二硫键断裂。 最后,进行第二向电泳,将滤纸旋转90度,其他条件与第一向电泳相同。 选取偏离对角线的产物(多肽或寡肽),即含有二硫键的片段,将其分离出来,分别测序,对照已测的全部氨基酸序列,找出二硫键位置。
【答案解析】